1、開機(jī)設(shè)定參數(shù)(檢測(cè)波長(zhǎng)、流速),更換所需流動(dòng)相,檢查色譜柱是否正確。
2、排液置換管路中流動(dòng)相,沖洗進(jìn)樣閥,洗好進(jìn)樣針。
3、沖洗色譜柱進(jìn)行平衡,其間可提前進(jìn)行樣品的處理,樣品信息的注冊(cè)。
4、平衡好以后進(jìn)空白試驗(yàn),排除系統(tǒng)污染。
5、柱子穩(wěn)定好以后進(jìn)樣,等待運(yùn)行結(jié)束(其間清洗進(jìn)樣針),積分計(jì)算,出具報(bào)告。
詳細(xì)操作步驟如下:
1、 開機(jī)操作:
(1)、打開電源,用Harb相連接時(shí),注意Harb電源,打開計(jì)算機(jī),打開Bootp Server(一般啟動(dòng)時(shí)已打開);
(2)、自上而下打開個(gè)組件電源,Bootp Server里顯示有信號(hào)時(shí)(有六行字符),打開工作站(先打開On line);
(3)、打開沖洗泵頭的10%異丙醇溶液的開關(guān)(需用針捅抽),控制流量大小,以能流出的最小流量為準(zhǔn);
(4)、注意各流動(dòng)相所剩溶液的容積設(shè)定,若設(shè)定的容積低于最低限會(huì)自動(dòng)停泵,注意洗泵溶液的體積,及時(shí)加液;
(5)、使用過(guò)程中要經(jīng)常觀察儀器工作狀態(tài),及時(shí)正確處理各種突發(fā)事件。
2、 先以所用流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)一定時(shí)間(如所用流動(dòng)相為含鹽流動(dòng)相,必須先用水沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動(dòng)相),正式進(jìn)樣分析前30min 左右開啟D燈或W燈,以延長(zhǎng)燈的使用壽命;
3、 建立色譜操作方法,注意保存為自己命名的Method,勿覆蓋或刪除他人的方法及實(shí)驗(yàn)結(jié)果;
4、 使用手動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣時(shí),在進(jìn)樣前和進(jìn)樣后都需用洗針液洗凈進(jìn)樣針筒,洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑,進(jìn)樣前必須用樣品液清洗進(jìn)樣針筒3遍以上,并排除針筒中的氣泡;
5、 溶劑瓶中的沙芯過(guò)濾頭容易破碎,在更換流動(dòng)相時(shí)注意保護(hù),當(dāng)發(fā)現(xiàn)過(guò)濾頭變臟或長(zhǎng)菌時(shí),不可用超聲洗滌,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌;
6、 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,一般先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個(gè)管路30分鐘以上,再用甲醇沖洗。沖洗過(guò)程中關(guān)閉D燈、W燈;
7、 關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)閉泵、檢測(cè)器等,再關(guān)閉工作站,然后關(guān)機(jī),最后自下而上關(guān)閉色譜儀各組件,關(guān)閉洗泵溶液的開關(guān);
8、 使用者須認(rèn)真履行儀器使用登記制度,不要擅自拆卸儀器。
流動(dòng)相:
1、 流動(dòng)相應(yīng)選用色譜純?cè)噭?、高純水或雙蒸水,酸堿液及緩沖液需經(jīng)過(guò)濾后使用,過(guò)濾時(shí)注意區(qū)分水系膜和油系膜的使用范圍;
2、 水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換(一般不超過(guò)2天),防止長(zhǎng)菌變質(zhì);
3、 使用雙泵時(shí),A、B、C、D四相中,若所用流動(dòng)相中有含鹽流動(dòng)相,則A、D(進(jìn)液口位于混合器下方)放置含鹽流動(dòng)相,B、C(進(jìn)液口位于混合器上方)放置不含鹽流動(dòng)相;
A、B、C、D四個(gè)儲(chǔ)液器中其中一個(gè)為棕色瓶,用于存放水相流動(dòng)相。
樣品:
1、 采用過(guò)濾或離心方法處理樣品,確保樣品中不含固體顆粒;
2、 用流動(dòng)相或比流動(dòng)相弱(若為反相柱,則極性比流動(dòng)相大;若為正相柱,則極性比流動(dòng)相?。┑娜軇┲苽錁悠啡芤海M量用流動(dòng)相制備樣品液;
手動(dòng)進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量盡量小,使用定量管定量時(shí),進(jìn)樣體積應(yīng)為定量管的3~5倍;
色譜柱:
1、 使用前仔細(xì)閱讀色譜柱附帶的說(shuō)明書,注意適用范圍,如pH值范圍、流動(dòng)相類型等;
2、 使用符合要求的流動(dòng)相;
3、 使用保護(hù)柱;
4、 如所用流動(dòng)相為含鹽流動(dòng)相,反相色譜柱使用后,先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇沖洗。
5、 色譜柱在不使用時(shí),應(yīng)用甲醇沖洗,取下后緊密封閉兩端保存;
6、 不要高壓沖洗柱子;
7、 不要在高溫下長(zhǎng)時(shí)間使用硅膠鍵合相色譜柱;